Le sequenze del test PCR per l’hantavirus corrispondono ripetutamente al DNA umano: una variante perfetta per dare il via al Gran Reset finale
Per chi scrivo e pubblico questi articoli è una domanda che mi pongo da tempo a cui non sono ancora riuscito a dare una riposta, per cortesia datemela voi che la mia pazienza ha raggiunto il limite. 🙁
Toba60
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Le sequenze del test PCR per l’hantavirus corrispondono ripetutamente al DNA umano
Un’analisi BLAST del primer diretto, del primer inverso e della sonda fluorescente utilizzati in un test RT-qPCR per l’hantavirus già pubblicato ha rivelato corrispondenze esatte e ripetute con il materiale genomico umano, sollevando dubbi sul fatto che, in determinate condizioni di analisi, gli acidi nucleici umani possano plausibilmente contribuire alla generazione di un segnale PCR positivo per l’hantavirus.
BLAST è l’acronimo di Basic Local Alignment Search Tool, un algoritmo bioinformatico ampiamente utilizzato per il confronto di sequenze biologiche.
In parole povere, alcune porzioni delle sequenze genetiche utilizzate dal test PCR per rilevare presumibilmente l’hantavirus corrispondono direttamente anche a sequenze di DNA umano.
Ciò significa che i componenti del test non erano specifici esclusivamente per l’hantavirus a livello di sequenza.
Risultati positivi potrebbero indicare la presenza di materiale umano, non virale.
La notizia arriva proprio mentre i media mainstream stanno lanciando l’allarme riguardo a una presunta epidemia di hantavirus su una nave da crociera al largo delle coste dell’Africa occidentale.
I nuovi risultati di BLAST assumono maggiore rilevanza se considerati alla luce del brevetto statunitense originale n. 5.210.015, il quale afferma esplicitamente che la complementarità delle sonde PCR «non deve necessariamente essere perfetta» e che un segnale rilevabile può verificarsi attraverso una «scissione indipendente dalla polimerizzazione», il che significa che la generazione di un segnale fluorescente rilevabile non richiede necessariamente l’amplificazione completa del bersaglio.
In parole povere, il brevetto originale alla base dei moderni test PCR TaqMan riconosce che il processo chimico è in grado di generare un segnale rilevabile anche quando la corrispondenza genetica è imperfetta e anche quando non si verifica l’amplificazione completa della sequenza bersaglio.
Anche una somiglianza parziale tra i componenti della PCR per l’hantavirus e il genoma umano potrebbe determinare un risultato positivo al test, anche in assenza del virus.
Primer e sonda per il test PCR
I componenti del test analizzati includevano:
1) Primer di senso positivo: GCAGCTGTGTCTACATTGGAGAA
2) Primer inverso: TGGTTTTGAAGCCAGTTTTTGA
3) Sequenza della sonda: AAACTCGCAGAACTCAAGAGACAGCTGGC
I dati sono stati ricavati da uno studio pubblicato nel dicembre 2019 su PLoS Neglected Tropical Diseases .
I primer sono brevi sequenze genetiche progettate per legarsi a una regione bersaglio, in modo da avviare l’amplificazione.
La sonda è il componente di rilevamento fluorescente che contribuisce a generare il segnale “positivo” rilevato dallo strumento.
La sequenza della sonda è stata ricavata dal test pubblicato dopo aver rimosso i marcatori chimici fluorescenti (il reporter e il quencher, ovvero FAM e ZEN), in modo da analizzare esclusivamente la sequenza nucleotidica stessa.
Il primer Forward ha prodotto numerosi riscontri con il genoma umano
L’analisi BLAST del primer anteriore ha prodotto numerose corrispondenze esatte e quasi esatte con il materiale genomico umano.
Ciò significa che alcune porzioni della sequenza del primer corrispondevano esattamente a sequenze già presenti in natura all’interno del genoma umano.
I risultati includevano:
1) 19 corrispondenze esatte su 19,
2) più corrispondenze esatte 18/18,
3) 17 corrispondenze esatte su 17,
4) e partite 16/16 molto diffuse.
Una “corrispondenza esatta 19/19″ indica che 19 lettere genetiche consecutive corrispondono perfettamente tra la sequenza analizzata e il DNA umano.
La sequenza è stata allineata con:
- regioni associate al gene GALNT6,
- regioni associate al gene EPHB2,
- regioni associate a ZBTB20,
- cromosoma 1,
- cromosoma 3,
- regioni potenziatrici,
- Librerie di cloni BAC,
- e numerosi altri loci del genoma umano.
Un allineamento ha mostrato:
«Identità: 19/19 (100%)»
Un altro mostrava:
“Identities:18/18(100%)”
Anche il primer inverso ha mostrato corrispondenze con il DNA umano su più cromosomi
Il primer inverso ha prodotto allineamenti umani altrettanto estesi.
In altre parole, entrambe le parti del sistema di amplificazione PCR hanno mostrato una sostanziale sovrapposizione di sequenze con il materiale genetico umano.
I risultati includevano:
- corrispondenze esatte ripetute 20/20,
- più corrispondenze esatte 18/18,
- numerose corrispondenze esatte 17/17,
- e numerose corrispondenze esatte 16/16.
Per «corrispondenza esatta 20/20» si intende che tutte e 20 le lettere genetiche sono perfettamente allineate con il DNA umano.
La sequenza è stata allineata con:
- RBFOX1,
- KCNH5,
- TGFB2,
- DLG2,
- CDH13,
- ROBO2,
- PLA2G4A,
- MYO5C,
- regioni della catena pesante delle immunoglobuline,
- e numerose regioni cromosomiche umane, tra cui i cromosomi 1, 3, 5, 8, 11, 14, 15, 16, 18, 20, 21, X e Y.
Un allineamento ha mostrato:
“Identità: 20/20 (100%)”
Altri hanno mostrato:
“Identità: 18/18 (100%)”
e:
«Identità: 17/17 (100%)»
La sonda di rilevamento fluorescente ha prodotto ripetutamente corrispondenze esatte con il genoma umano
I risultati più significativi sono emersi dall’analisi BLAST della sonda fluorescente TaqMan stessa, ovvero la sequenza direttamente coinvolta nel processo chimico di rilevamento del segnale.
Questo è importante perché la sonda è la parte responsabile della generazione del segnale fluorescente che il termociclatore interpreta come un «risultato positivo».
La sonda ha prodotto:
- 18 corrispondenze esatte su 18,
- numerose corrispondenze esatte 17/17,
- 16 corrispondenze esatte ripetute,
- e un allineamento del 20/21 (95%) con il DNA genomico umano.
Una corrispondenza 20/21 significa che 20 delle 21 sequenze genetiche corrispondono al DNA umano.
La sonda è allineata con:
- cromosoma 1,
- cromosoma 12,
- cromosoma 18,
- cromosoma 19,
- cromosoma 21,
- TMEM192,
- varianti della trascrizione MGA,
- BCLAF3,
- SESN1,
- regioni promotrici di OCT4-NANOG,
- e diverse librerie genomiche umane BAC e FOSMID.
Un allineamento ha mostrato:
“Identità: 18/18 (100%)”
Un altro mostrava:
“Identità: 17/17 (100%)”«Identità: 20/21 (95%)»
E un altro mostrava:
Il brevetto originale di TaqMan riconosce l’imperfetta complementarità
Il brevetto originale TaqMan PCR afferma esplicitamente:
«La complementarità non deve necessariamente essere perfetta; i duplex stabili possono contenere coppie di basi non corrispondenti o basi non accoppiate.»
Il brevetto riconosce che il processo chimico che produce risultati positivi può funzionare anche quando la corrispondenza genetica non è perfetta.
Il brevetto precisa inoltre:
«In questo processo, non è necessaria la polimerizzazione per portare la polimerasi dell’acido nucleico nella posizione necessaria per effettuare il taglio; per questo motivo lo chiamiamo “taglio indipendente dalla polimerizzazione”».
Ciò significa che la reazione chimica che genera il segnale rilevabile può avvenire anche senza un’amplificazione completa della sequenza bersaglio.
Hanno già pronto il vaccino prima che comparisse con annessi gli effetti collaterali ……sono formidabili!!!
E poi:
«In questo modo è possibile generare una quantità sufficiente di frammenti marcati, rendendo possibile il rilevamento anche in assenza di polimerizzazione.»
Ciò significa che il brevetto descrive esplicitamente situazioni in cui è possibile ottenere un segnale rilevabile anche senza il processo di amplificazione completo che solitamente si associa alla PCR.
Il brevetto spiega inoltre:
«Uno dei vantaggi del processo indipendente dalla polimerizzazione consiste nell’eliminazione della necessità di amplificare la sequenza bersaglio.»
La generazione di un segnale rilevabile può avvenire senza che sia necessario amplificare prima integralmente la sequenza genetica del bersaglio.
In conclusione
I risultati di BLAST e il testo del brevetto dimostrano che:
1) il primer di senso positivo presenta sequenze identiche ripetute con il DNA umano,
2) il primer inverso presenta sequenze identiche ripetute con il DNA umano,
3) e la stessa sonda di rilevamento fluorescente presenta sequenze identiche ripetute con il DNA umano.
Tutte e tre le principali componenti coinvolte nel sistema di amplificazione e rilevamento del test hanno mostrato una sovrapposizione diretta della sequenza con il materiale genetico umano.
Nel frattempo, il brevetto originale di TaqMan riconosce esplicitamente che:
1) la complementarità «non deve necessariamente essere perfetta»,
2) può verificarsi un segnale rilevabile attraverso una «scissione indipendente dalla polimerizzazione»,
3) e il rilevamento può avvenire «in assenza di polimerizzazione».
Nel loro insieme, questi risultati suggeriscono che il materiale genetico umano stesso potrebbe plausibilmente contribuire alla generazione di un segnale positivo alla PCR per l’hantavirus in determinate condizioni di analisi.
Se i primer e la sonda di rilevamento fluorescente del test si sovrappongono in modo sostanziale al materiale genetico umano, i cosiddetti «casi» di hantavirus potrebbero non essere altro che il risultato del sistema PCR che rileva il materiale genetico del paziente stesso anziché un vero e proprio virus.
Jon Fleetwood
Fonte: jonfleetwood.substack.com & Deepweb
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